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Vert clair SF Jaunâtre, formule moléculaire C37H37N2NaO9S3, CAS 5141-20-8, généralement soluble dans l'eau ou dans certains solvants organiques tels que l'éthanol, l'acétone, etc. Sa solubilité est influencée par des facteurs tels que la température, le type de solvant et la concentration. Une bonne solubilité rend le SF vert vif facile à utiliser en solution, facilitant les opérations de coloration et de détection de fluorescence. En tant que SF vert vif à l'état liquide ou en solution, sa densité et sa viscosité sont affectées par des facteurs tels que le type de solvant, sa concentration et sa température. À l'état pur ou à forte concentration, le SF vert vif peut avoir une densité et une viscosité plus élevées ; Dans les solutions diluées, ces propriétés physiques diminueront en conséquence. Les caractéristiques les plus importantes sont sa teinte vert vif et ses fortes propriétés de fluorescence. Sous irradiation ultraviolette (UV), ce colorant peut émettre une fluorescence verte brillante et distincte, ce qui le rend largement utilisé dans la coloration biologique, l'étiquetage fluorescent, l'étiquetage de sécurité et d'autres domaines.
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Formule chimique |
C37H34N2Na2O10S3 |
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Masse exacte |
808 |
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Poids moléculaire |
809 |
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m/z |
808 (100.0%), 809 (40.0%), 810 (13.6%), 811 (5.4%), 810 (5.1%), 810 (2.7%), 809 (2.4%), 810 (2.1%) |
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Analyse élémentaire |
C, 54,94 ; H, 4,24 ; N, 3,46 ; Na, 5,68 ; O, 19.78 ; S, 11.89 |
Vert vif SF (jaune pâle), également appelé vert acide 5, vert vif (jaune pâle), vert vif 2G, vert vif S, vert vif 2GN, vert acide, jaune vert clair SF, vert clair SF jaune pâle, jaune vert vif, vert acide SF,vert clair SF jaunâtre, etc., est un produit chimique largement utilisé dans de multiples domaines.
1. Champ biologique
(1) Coloration cytologique :
Couramment utilisé pour la contre-coloration en cytologie, en particulier dans les expériences histologiques et de biologie cellulaire, afin d'améliorer la visibilité des structures cellulaires. Il peut afficher clairement le cytoplasme, les organites et les structures cellulaires spécifiques, fournissant ainsi aux chercheurs des informations morphologiques cellulaires détaillées.
(2) Alternative dans la procédure de Gomori :
Dans la méthode de coloration trichrome de Gomori, il peut être utilisé comme substitut au bleu d'aniline. La coloration trichrome de Gomori est une méthode de coloration utilisée pour l'identification du type de fibre musculaire, ce qui rend la méthode plus flexible et plus efficace dans des conditions spécifiques.
(3) Détection des protéines :
Il est également utilisé pour détecter des protéines, notamment dans les expériences biochimiques et de biologie moléculaire. Il peut indiquer la présence et le contenu de protéines en formant avec elles des complexes spécifiques ou en changeant de couleur.
(4) Traitement des maladies liées :
Des études ont montré que ses analogues pourraient jouer un rôle dans le traitement des maladies associées à l'apolipoprotéine E (ApoE). Bien que la recherche dans ce domaine en soit encore à ses débuts, ses perspectives d’application potentielles méritent qu’on s’y intéresse.
2. Domaine médical
(1) Diagnostic clinique :
Peut être utilisé pour préparer des réactifs de diagnostic clinique pour aider les médecins dans le diagnostic précoce et le diagnostic différentiel des maladies. Ces réactifs peuvent indiquer l'état de la maladie en détectant des changements de couleur ou d'autres signaux basés sur leurs interactions avec des biomolécules ou des cellules spécifiques.
(2) Histopathologie :
Dans l'étude de l'histopathologie, la coloration de coupes de tissus est couramment utilisée pour révéler la structure des tissus et les changements pathologiques. Cela peut aider les pathologistes à diagnostiquer les maladies avec plus de précision et à évaluer la gravité et le pronostic de la maladie.
3. Domaine de recherche
A une position importante dans le domaine de la recherche scientifique, notamment en biologie et en recherche médicale.
Contre-coloration cytologique : couramment utilisé comme agent de contre-coloration en cytologie, il peut afficher clairement la structure et la morphologie cellulaire.
Substitut de l'étape de Gomori : Dans la méthode de coloration de Gomori, il peut être utilisé comme substitut au bleu d'aniline pour une coloration spécifique des tissus.
Coloration plasmatique : en tant qu'agent de coloration plasmatique, il peut colorer le cytoplasme des cellules, ce qui permet d'observer et d'étudier la structure interne des cellules.
Coloration des tissus animaux : Dans la coloration des tissus animaux, elle est couramment utilisée pour colorer des parties spécifiques des tissus animaux, telles que les muscles, le tissu conjonctif, etc.
Coloration comparative : elle peut être comparée à l’hématoxyline ou à d’autres colorants nucléaires pour mettre en évidence différentes structures dans les tissus.
Coloration des tissus végétaux : en histologie végétale, elle est utilisée pour colorer le cytoplasme et les fibres, ce qui permet d'afficher clairement la morphologie et la structure des cellules végétales.
4. Recherche biochimique
Il joue également un rôle important dans la recherche biochimique.
Réactifs biochimiques : peuvent être utilisés comme réactifs d'électrophorèse, réactifs de chromatographie, réactifs de séparation par centrifugation, réactifs d'immunoessai, réactifs de marquage, réactifs de chimie tissulaire et autres réactifs biochimiques pour la séparation, la purification et la détection de biomolécules.
Recherche cancérigène : également utilisée dans l'étude des substances cancérigènes pour évaluer leurs risques potentiels pour la santé.
Additif de milieu de culture : En culture microbienne, il peut être utilisé comme additif dans le milieu de culture pour favoriser la croissance et la reproduction des micro-organismes.
5. Diagnostic médical
Il présente également une valeur significative dans le domaine du diagnostic médical.
Coloration histopathologique : En histopathologie, il est couramment utilisé pour la coloration trichrome Masson des fibres de collagène, la coloration Pap, la coloration polychrome cytologique et la coloration microbiologique de coupes de tissus pour diagnostiquer les maladies et observer le processus des lésions.
Recherche en neurosciences : une méthode de coloration multicolore-peut être utilisée pour différencier les cellules sécrétrices de l'hypophyse, ce qui permet d'étudier la structure et le fonctionnement du système nerveux.
Coloration immunohistochimique : Dans la coloration immunohistochimique, il peut être utilisé comme agent de coloration auxiliaire pour afficher la distribution d'antigènes ou d'anticorps spécifiques.
6. Autres applications
En plus des domaines mentionnés ci-dessus, il a également les applications suivantes.
Colorant pour aliments et boissons : Il s’agit d’un colorant autorisé à être utilisé dans les aliments et les boissons, qui peut donner aux aliments une couleur vert vif.
Insecticides : Dans certains cas, ils peuvent également être utilisés comme insecticides pour contrôler le nombre et la répartition des ravageurs.
Surveillance environnementale : il peut également être utilisé pour la surveillance environnementale, telle que les tests de qualité de l'eau, l'évaluation de la pollution des sols, etc.
Informations de base et préparation des matières premières
Matières premières pour la production deVert clair SF Jaunâtredoivent subir un contrôle strict. Les matières premières de base comprennent la N,N-diéthylaniline (pureté supérieure ou égale à 99 %, humidité inférieure ou égale à 0,5 %), le 3-sulfobenzaldéhyde (pureté supérieure ou égale à 98 %), l'acide sulfurique concentré de qualité industrielle (concentration 98 %), l'hydroxyde de sodium (pureté supérieure ou égale à 96 %) et le bichromate de sodium (oxydant). Le matériau auxiliaire est une solution saturée de chlorure de sodium (pour le relargage). Toutes les matières premières doivent être conformes aux normes industrielles GB/T pour éviter que les impuretés n'affectent la couleur et l'uniformité de la teinture du produit.
Processus de synthèse de base
Le processus de synthèse se déroule en quatre étapes, avec une température et un pH contrôlés tout au long du processus :
Réaction de condensation:
Ajoutez de l’acide chlorhydrique dans la bouilloire de réaction pour ajuster le pH du système à 1-2, puis ajoutez de la N,N-diéthylaniline et du 3-sulfobenzaldéhyde dans un rapport molaire de 1 : 1,2. Chauffez le mélange à 40-50 degrés et remuez à température constante pendant 3 à 5 heures pour générer un intermédiaire triarylméthane. Un gaz inerte (azote) doit être introduit en continu pendant la réaction pour éviter l'oxydation de l'intermédiaire.
Oxydation et sulfonation:
Ajoutez lentement une solution de dichromate de sodium au système, chauffez à 60-70 degrés pour l'oxydation pendant 2 à 3 heures, puis ajoutez de l'acide sulfurique fumant comme agent de sulfonation et chauffez à 80-90 degrés pour la sulfonation pendant 1 à 2 heures pour introduire des groupes d'acide sulfonique et améliorer la solubilité dans l'eau du produit. Une agitation uniforme est nécessaire pendant la sulfonation pour éviter la formation de sous-produits - provoqués par une surchauffe locale.
Neutralisation et relargage:
Neutralisez lentement la solution réactionnelle à un pH de 7 à 8 avec une solution d'hydroxyde de sodium à 40 % pour générer du sel disodique soluble dans l'eau. Après repos et refroidissement à température ambiante, ajouter lentement une solution saturée de chlorure de sodium et remuer jusqu'à ce qu'une grande quantité de solide précipite. Après 4 heures de repos pour précipitation, filtrer pour obtenir un gâteau de filtration brut.
Purification et séchage:
Lavez le gâteau de filtration à plusieurs reprises avec de l'eau déminéralisée 3 à 4 fois jusqu'à ce que la solution de lavage soit neutre (sans résidu d'ions chlorure). Placez ensuite le gâteau dans une étuve sous vide et séchez-le à 60-70 degrés sous un vide de -0,08~-0,09 MPa pendant 8 heures. Après broyage, passer au tamis de 80 mailles pour obtenir le colorant fini.
Normes de contrôle de qualité
Le produit fini doit passer plusieurs tests et être conforme aux normes de l’industrie :
Exigences de pureté: La pureté est un indicateur essentiel déterminant le pouvoir colorant et l'effet d'application du colorant, et les méthodes de détection sont standardisées en fonction des qualités des produits. Pour le Light Green SF Yellowish de qualité industrielle générale, la teneur en colorant, quantifiée par spectrophotométrie à la longueur d'onde d'absorption maximale (629-634 nm), ne doit pas être inférieure à 80 %. Pour les produits de qualité de coloration biologique -haut de gamme-, qui sont utilisés dans l'analyse microscopique et la détection clinique, des critères de pureté plus stricts s'appliquent : la pureté doit être supérieure ou égale à 85 % (méthode spectrophotométrique) et la pureté de la chromatographie liquide haute-performance (HPLC) doit atteindre supérieure ou égale à 99 %. Cette exigence stricte de HPLC garantit l’absence de traces d’impuretés susceptibles d’interférer avec les résultats de coloration ou d’affecter la sécurité biologique.
Indicateurs clés: Une série d'indicateurs clés sont testés pour garantir la stabilité et l'applicabilité du colorant dans divers scénarios. La longueur d'onde d'absorption maximale est strictement contrôlée dans la plage de 629 à 634 nm, avec une absorbance supérieure ou égale à 0,85, ce qui garantit une intensité de coloration et des performances spectrales constantes. La teneur en humidité ne doit pas dépasser 5 % pour éviter l'agglomération pendant le stockage et la dégradation de l'activité du colorant ; la teneur en cendres est limitée à moins ou égale à 3 % pour réduire les impuretés inorganiques qui peuvent affecter la solubilité et l'uniformité de la coloration. Concernant les indicateurs de sécurité, la teneur totale en métaux lourds (y compris le plomb, l'arsenic, le mercure et le cadmium) doit être inférieure ou égale à 10 ppm, entièrement conforme à la norme nationale sur les additifs alimentaires GB 2760, répondant ainsi aux exigences de sécurité pour les applications de colorants alimentaires et de réactifs biologiques.
Test de stabilité: Des tests de stabilité sont effectués pour vérifier la durabilité de stockage du produit et sa résistance aux conditions difficiles. Dans des conditions de stockage standard -emballage scellé, environnement sombre et température ambiante (20 à 25 degrés)-le produit fini doit avoir une durée de conservation d'au moins 2 ans, sans changement évident de couleur, de solubilité ou de performances de coloration. Pour le test de stabilité thermique, le produit est placé dans un environnement à température constante-à 60 degrés pendant 72 heures ; après le test, il ne doit y avoir aucune décoloration évidente et le pouvoir colorant doit rester supérieur ou égal à 95 % de la valeur initiale, garantissant son adaptabilité aux environnements de traitement ou de stockage à haute température.
Normes de sécurité de production et de protection de l'environnement
La production doit être conforme aux normes GMP et de protection de l'environnement :
L'atelier est équipé d'une tour d'absorption des gaz résiduaires acides pour traiter les gaz HCl et SO₂ générés lors de la condensation et de la sulfonation, qui sont évacués aux normes après neutralisation avec de la lessive.
Les eaux usées de production sont d'abord ajustées à un pH de 6 à 9 dans un réservoir de neutralisation, puis traitées par floculation, précipitation et procédés biochimiques, et évacuées uniquement lorsque la DCO est inférieure ou égale à 50 mg/L et la saturation inférieure ou égale à 50 fois.
Les opérateurs doivent porter des vêtements de protection-résistants aux acides, des masques à gaz et des gants de protection pour empêcher le colorant d'entrer en contact avec la peau et les voies respiratoires.
Le produit fini doit être emballé hermétiquement et stocké dans un entrepôt frais et sec, à l'écart des oxydants, et ne doit pas être stocké avec des aliments et des produits pharmaceutiques.
Vert clair SF Jaunâtrea un large éventail d'applications dans les études d'histologie et de pathologie en tant que colorant histologique pour le collagène.
Objectif de l'étude : Observer et analyser la distribution et la structure du collagène dans les tissus cutanés.
Méthode de coloration : Coloration de coupes de tissus cutanés à l’aide de Bright green SF.
Résultats : Après coloration, les fibres de collagène présentaient une couleur verte distincte, tandis que d’autres structures tissulaires présentaient des couleurs différentes. Cela permet aux chercheurs d’observer clairement la direction, la distribution et la morphologie des fibres de collagène, et ainsi d’analyser la structure et la fonction des tissus cutanés.
Application : Les résultats de cette étude aident à comprendre les changements physiologiques et pathologiques des tissus cutanés, fournissant ainsi une base importante pour la recherche et le traitement des maladies de la peau.
Contexte : La croissance et l’invasion tumorales sont souvent étroitement liées aux changements structurels des tissus environnants, en particulier aux changements des fibres de collagène.
Méthode de coloration : des coupes de tissus tumoraux ont été colorées avec du SF vert vif pour observer la morphologie et la distribution des fibres de collagène.
RÉSULTATS : Dans les tissus tumoraux, la distribution et la morphologie des fibres de collagène ont subi des modifications significatives, telles qu'un épaississement, une désorganisation ou une cassure des fibres. Ces changements étaient étroitement liés au degré de malignité, à l'agressivité et au pronostic de la tumeur.
Application : Grâce à l’analyse des fibres de collagène, les chercheurs peuvent évaluer l’agressivité et le pronostic des tumeurs, fournissant ainsi une référence importante pour l’élaboration de plans de traitement des tumeurs.
Objectif de l'étude : Étudier les modifications des fibres de collagène dans les maladies fibrotiques et leur relation avec la progression de la maladie.
Matériel expérimental : Échantillons de tissus provenant de patients atteints de maladies fibrotiques.
Procédure de coloration : Coloration d’échantillons de tissus à l’aide de Bright green SF pour observer la morphologie et le nombre de fibres de collagène.
Résultats : Dans les maladies fibrotiques, le nombre de fibres de collagène a augmenté de manière significative et la morphologie a changé anormalement. Ces changements sont étroitement liés à la gravité et à la progression de la maladie.
Application : Cette étude aide à révéler la pathogenèse des maladies fibrotiques et fournit de nouvelles idées et méthodes pour le diagnostic et le traitement des maladies.
Contexte : Le tissu osseux est principalement composé de collagène et de minéraux, et le collagène joue un rôle important dans la structure et la fonction du tissu osseux.
Méthode de coloration : Des coupes de tissu osseux ont été colorées avecVert clair SF Jaunâtreafin d'observer la répartition et la morphologie du collagène.
Résultats : Après coloration, les fibres de collagène du tissu osseux ont montré une couleur vert clair, ce qui a permis aux chercheurs d'observer avec précision la distribution et la morphologie du collagène dans le tissu osseux.
APPLICATIONS : Les résultats de cette étude peuvent aider à comprendre les changements physiologiques et pathologiques du tissu osseux et fournir une base importante pour la recherche et le traitement des maladies osseuses.
En résumé, le SF vert vif en tant que colorant histologique pour le collagène a un large éventail d'applications dans la recherche en histologie et en pathologie. Grâce à l'observation et à l'analyse des colorations, les chercheurs peuvent clairement observer la distribution, la morphologie et les changements structurels des fibres de collagène, puis comprendre l'état physiologique et pathologique des tissus, fournissant ainsi une base importante pour le diagnostic et le traitement des maladies.
FAQ
Qu'est-ce que la tache vert clair SF ?
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Light Green SF Yellowish est un colorant vert triarylméthane. Il est utilisé en histologie pour la colorationcollagène. Il se présente sous la forme d'une poudre rouge brunâtre-à violette et est soluble dans l'eau froide. Synonymes : Vert Acide 5 ; N vert acide rapide ; Midori205.
Qu'est-ce que le SF vert clair dans un test Pap ?
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Le SF vert clair est un colorant acide qui colore en vert le cytoplasme des cellules métaboliquement actives, c'est-à-dire les cellules squameuses intermédiaires, les cellules parabasales, les cellules endocervicales, les histiocytes, les leucocytes, les cellules de carcinome indifférencié et les cellules d'adénocarcinome.
Le vert clair colore-t-il le cytoplasme ?
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Les structures d'une coupe de tissu sont colorées comme suit : les sels de calcium sont colorés en noir, les noyaux en rouge et le cytoplasme en rose.Si cette coloration est réalisée avec du Light Green, les sels de calcium seront colorés en noir, les noyaux en vert plus foncé et le cytoplasme en vert..
Le vert clair tache-t-il le collagène ?
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Le vert clair est le colorant standard en Amérique du Nord pour colorer le collagène.contrairement à la fuchsine acide dans le trichrome de Masson. C'est un composant de la série EA de Papanicolaou en association avec l'éosine Y et le brun bismarck. Il est également largement utilisé en histologie végétale.
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