Poudre Iptg CAS 367-93-1

Poudre IPTGpeut être utilisé pour le site d'action anesthésique local, il est appliqué comme agent d'épandage pour le soulagement post-de la douleur des plaies et des ulcères. Réactifs biologiques moléculaires couramment utilisés dans le dépistage des taches bleues et blanches et l'expression des protéines induites par l'IPTG dans les bactéries. IPTG, nom complet isopropyl- - D-thiogalactoside, CAS 367-93-1, formule moléculaire C9H18O5S, poids moléculaire 384,37 Daltons, appartient à des composés à petites molécules. Poudre blanche ou presque blanche, faiblement soluble dans l'eau mais meilleure solubilité dans les solvants organiques. Il y a des groupes ioniques dans les molécules, elles ont donc un certain degré de conductivité dans l'eau. Stable à température ambiante, mais facile à décomposer à haute température ou dans des conditions acides et alcalines fortes. Il n'y a pas d'odeur évidente, mais une légère odeur de composé organique peut être émise lors de l'utilisation. Il s’agit d’un inducteur couramment utilisé pour induire l’expression des protéines chez les bactéries. Dans le diagnostic médical, l'IPTG peut servir de sonde fluorescente ou d'agent chromogène pour détecter des molécules ou des tissus spécifiques dans des échantillons. En se combinant avec des molécules cibles, l'IPTG peut générer des signaux fluorescents ou des changements de couleur, apportant ainsi un soutien solide au diagnostic de la maladie.

poudre Iptg,Paramètres physiques, Mp. : 114 ~ 121 degrés C, Description de l'utilisation, Réactifs de biologie moléculaire courants, couramment utilisés dans le criblage bleu-blanc et l'expression de protéines induites par IPTG-dans les bactéries. , Spécifications d'emballage , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Conditions de stockage

2-8 degrés réfrigéré, à l'abri de la lumière, Description du danger, Code de danger : Xi, Niveau de risque : R36/37/38, Niveau de sécurité : S23-24/25-36.

L'IPTG est couramment utilisé dans les expériences de clonage qui doivent induire une activité -galactosidase. Il est souvent utilisé en combinaison avec X-Gal ou Bluo-Gal pour le criblage bleu-blanc des colonies bactériennes recombinantes, qui peuvent être induites par Chemicalbook pour exprimer l'opéron lac dans E. coli. L'IPTG se lie à la protéine répresseur lacI et modifie sa conformation pour empêcher l'inhibition du gène lacZ codé par la -galactosidase.

L'IPTG, nom complet isopropyl- -D-thiogalactoside est un inducteur couramment utilisé pour induire et réguler l'expression des protéines. En raison de sa structure et de sa fonction uniques, l'IPTG est généralement préparé à l'aide dePoudre IPTGméthodes de synthèse en laboratoire.

Poudre IPTGnom complet isopropyl- - D-thiogalactoside est un inducteur couramment utilisé pour induire et réguler l'expression des protéines.

1. Induction de l’expression des protéines :

L'IPTG joue un rôle important dans l'induction de l'expression des protéines. Il s’agit d’un inducteur largement utilisé qui peut induire efficacement l’expression de gènes spécifiques chez les bactéries, obtenant ainsi la protéine cible souhaitée en peu de temps. Son mécanisme d'action consiste à se lier au gène lacI des bactéries, à inhiber l'activité de sa protéine régulatrice de transcription, ouvrant ainsi l'opéron lac des bactéries et à initier l'expression des gènes cibles. Lors de l'utilisation d'opérons du lactose comme promoteurs pour l'expression des protéines, des inducteurs sont nécessaires et l'IPTG peut agir comme un analogue du lactose pour induire l'expression de la galactosidase chez Escherichia coli. Il ne peut pas être utilisé par les cellules pour obtenir une expression soutenue. IPTG se lie à lac|produits, provoquant des changements conformationnels par rapport à lacO, activant ainsi la transcription. Cette régulation transcriptionnelle inductible est devenue un élément couramment utilisé dans la construction de vecteurs du système d'expression d'E. coli.

2. Régulation de l’expression des gènes :

 

L'IPTG joue un rôle important dans la régulation de l'expression des gènes. En tant que réactif expérimental important, il joue un rôle important dans les expériences de régulation de l’expression des gènes et de surexpression des protéines. En contrôlant le temps d’addition et la concentration d’IPTG, il est possible de réguler l’expression de la protéine cible. Cet effet régulateur est basé sur la liaison de l'IPTG au lac|produits dans les opérons lactose, modifiant leur conformation, laissant ainsi lacO et activant davantage la transcription. Ce mécanisme de régulation transcriptionnelle inductible confère à l’IPTG une grande importance dans des domaines de recherche tels que la fonction des gènes, les interactions protéiques et le criblage de médicaments.

3. Cristallisation des protéines :

 

Dans les expériences de cristallisation des protéines, l’IPTG est utilisé comme inducteur pour favoriser la cristallisation des protéines. Son mécanisme d'action consiste à modifier la conformation des protéines en se liant aux régions hydrophobes des protéines, favorisant ainsi l'agrégation et la cristallisation entre les molécules protéiques. Ce processus d'agrégation et de cristallisation est réversible, de sorte que la cristallisation des protéines peut être induite en ajoutant de l'IPTG, ou que les cristaux de protéines peuvent être dissous en éliminant l'IPTG.

Dans les expériences de cristallisation des protéines, l'IPTG est généralement ajouté à la solution protéique à une concentration finale de 1 mM. Cette faible concentration d'IPTG peut éviter une induction excessive de protéines, obtenant ainsi de meilleurs effets de cristallisation. Dans le même temps, l’IPTG peut également servir de chaperon moléculaire pour aider au repliement et à l’agrégation corrects des protéines, obtenant ainsi des cristaux de protéines plus uniformes.
Il convient de noter que l’IPTG ne favorise pas la cristallisation des protéines dans tous les cas. Certaines protéines ne sont pas sensibles à l'IPTG, ou en raison de leur structure et de leurs propriétés inhérentes qui ne conviennent pas à la cristallisation, une validation et une optimisation expérimentales sont nécessaires pour différentes protéines afin de déterminer les conditions et méthodes de cristallisation optimales.

Cytotoxicité

 

Toxicité pour les cellules procaryotes

Bien que l'IPTG soit couramment utilisé pour induire l'expression de gènes dans les cellules procaryotes, des concentrations élevées d'IPTG peuvent avoir des effets toxiques sur les cellules procaryotes. Des recherches ont montré que lorsque la concentration d’IPTG est trop élevée, elle peut interférer avec les processus métaboliques normaux au sein des cellules. Par exemple, cela peut affecter le métabolisme énergétique des cellules, interférer avec des voies telles que la glycolyse et le cycle de l’acide tricarboxylique, entraînant une diminution de la production intracellulaire d’ATP et affectant la croissance et la prolifération cellulaires. En outre, des concentrations élevées d'IPTG peuvent également endommager l'intégrité de la membrane cellulaire, augmenter sa perméabilité, entraîner une fuite de substances intracellulaires et permettre à des substances nocives de l'environnement extracellulaire de pénétrer dans la cellule, provoquant ainsi la mort cellulaire. Des expériences ont montré que lorsque Escherichia coli est cultivée dans un milieu contenant de fortes concentrations d’IPTG, le taux de croissance des bactéries ralentit considérablement et le nombre de bactéries viables diminue progressivement avec l’allongement de la durée de culture. Cela indique que des concentrations élevées d'IPTG ont un certain effet inhibiteur et mortel sur Escherichia coli.

Toxicité pour les cellules eucaryotes

En plus des cellules procaryotes, l'IPTG peut également être toxique pour les cellules eucaryotes. Il existe certaines différences de structure et de fonction entre les cellules eucaryotes et les cellules procaryotes, mais l'IPTG peut toujours affecter les fonctions physiologiques normales des cellules eucaryotes par diverses voies. D’une part, l’IPTG peut interférer avec les voies de transduction du signal au sein des cellules eucaryotes. La transduction du signal au sein des cellules joue un rôle régulateur crucial dans des processus tels que la croissance, la différenciation et l'apoptose. L'IPTG peut modifier l'intensité et la direction de la transduction du signal en interagissant avec certaines molécules de signalisation au sein des cellules, affectant ainsi les activités physiologiques normales des cellules.

Toxicité pour les cellules eucaryotes

D’un autre côté, l’IPTG peut induire une réponse au stress oxydatif dans les cellules eucaryotes. Le stress oxydatif fait référence à un déséquilibre entre l’oxydation intracellulaire et l’activité antioxydante, entraînant une augmentation de la production d’espèces réactives de l’oxygène (ROS). Un excès de ROS peut attaquer des biomolécules telles que l’ADN, les protéines et les lipides dans la cellule, provoquant des dommages cellulaires et des déficiences fonctionnelles. Des recherches ont montré que dans certaines conditions, le traitement IPTG des cellules eucaryotes augmente considérablement les niveaux de ROS intracellulaires, accompagné d'une diminution de la viabilité cellulaire et d'une augmentation du taux d'apoptose. Ceci suggère que l'IPTG pourrait induire une réponse au stress oxydatif et exercer une toxicité sur les cellules eucaryotes.

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